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E607054-0001 | 1ML | 現貨 | 230 | 230 |
概述
嘌呤黴素(Puromycin)是由白黑鏈黴菌(Streptomyces alboniger)發酵代謝產生的一種氨基糖苷類抗生素,常用於篩選通過質粒轉染、轉化、病毒感染等方法能表達pac基因(puror)的真核或原核多克隆或單克隆細胞。Puromycin不僅用於穩定細胞株的篩選,也用於穩定細胞株的維持。在革蘭氏陽性菌、動物或昆蟲細胞中,嘌呤黴素通過抑製蛋白質合成而抑製或殺死細胞。其作用機製為嘌呤黴素是氨酰-tRNA分子3'末端的類似物,能夠與核糖體的A位點結合並摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤黴素與A位點結合後,不會參與隨後的任何反應,從而導致蛋白質合成的提前終止並釋放出C-末端含有嘌呤黴素的不成熟多肽。 Pac基因表達嘌呤黴素N-乙酰轉移酶(Puromycin N-acetyl-tranferase),該基因是在Streptomyces alboniger中發現的。如果表達基因,就會對嘌呤黴素產生抗性,這一特性目前普遍應用於篩選表達pac基因的哺乳動物穩定細胞株等。例如,很多商業化的慢病毒載體都攜帶pac基因(一般在質粒圖譜上標記為puror),從而利用嘌呤黴素篩選特定基因的穩定表達細胞株。嘌呤黴素也可以用來篩選表達pac基因的大腸杆菌菌株、酵母菌株等。
特點
- 快速作用於細胞,一般兩天可以殺死99%不表達pac基因的細胞。
應用
細胞培養,篩選特定基因的穩定表達細胞株
組分
10 mg/ml, 20 mM HEPES 緩衝液 (pH7.2-7.4)

