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DNA測序樣品要求

各類樣品模板均應提供相應的模板和引物信息,並清楚地填寫《必威betway官方网站登录 測序訂單》

模板 要求
未純化PCR產物 片段大於200 bp;
提供 30 μl以上的PCR擴增產物(濃度大於100ng/μl);
取3 μl樣品,能夠清晰的檢測出目的條帶;
自帶引物。
已純化PCR產物 PCR產物溶於雙蒸水中(請勿溶解在TE溶液中);
濃度大於100 ng/μl,體積大於20 μl,長片段需適當增加提供量;
電泳檢測條帶單一明亮;
自帶引物。

質粒
需提供20 μl以上質粒,濃度大於100ng/μl,質粒溶於雙蒸水中(請勿溶解在TE溶液中);
建議用相關試劑盒提取質粒;
如有可能,同時提供200μl含有相應質粒的菌液備用;
需注明載體全稱和插入目的片段長度及測序要求。
菌樣 說明載體、抗性類型;我們提供氨苄青黴素和卡那黴素兩種抗生素;其餘類型抗生素需自備並附使用說明;
應為高拷貝質粒,對於低拷貝質粒,請直接提供約1 μg純化質粒;
提供200 μl以上過夜培養(12 h)的新鮮菌液,於EP管中封口保存,防止交叉汙染或滲漏;
大量樣品測序,建議在一次性塑料培養皿固體培養基上穿刺培養;
建議盡量提供穿刺培養或斜麵培養的菌種(裝在EP管中)。
自帶引物 濃度不低於10 pmol/μl(即10 μmol/L),體積10 μl以上,並請注明濃度;
隨機引物(RAPD引物)、簡並引物、長度不足15 bp或大於30 bp引物、有特殊標記的引物或不純的引物均不能用於測序;
盡可能提供引物全序列、PCR退火溫度等信息,以供參考。
免費提供的通用引物 M13+[即M13-47], M13-[即M13-48], M13(-20), M13(-26), T7promoter,
T7 terminator, SP6, T3, BGH,
5'/3'AOX, α-factor, -96gⅢ, pBV220+/-, pEGFP-N5'/3', pEGFP-C5',3',
pCMV5-F/R, pQE30+/-, 5'/3'AD,
pGEX5'/3', pGL3+/-, 27F, 1492R, CMV, U6promoter, S-Tag等通用引物。
如您需要的引物不在此列,請電話谘詢或自帶引物,如需生工合成,請注明。

溫馨提示

1.對於穿刺培養菌、以及抽幹的質粒可以采用常溫運輸。
2. 對於甘油菌、溶解保存的質粒、PCR已純化和未純化產物建議冷藏運輸。

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