概述

該產品催化粘端或平端雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5’ 磷酸基團和3’ 羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。酶還可以修複雙鏈DNA，RNA或DNA/RNA複合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但是該酶對單鏈核酸無酶活性。T4 DNA連接酶需要輔因子ATP

應用

粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA複合體中缺口的修複;連接酶介導的RNA檢測;位點特異性突變;擴增片段長度多態性

使用說明

連接產物酶切前無需純化，可將限製酶直接加入連接反應混合物中

組份

T4 DNA Ligase,10X T4 DNA Ligase Buffer

技術規格

描述	T4 DNA連接酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5’ 磷酸基團和3’ 羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。酶還可以修複雙鏈DNA，RNA或DNA/RNA複合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但是該酶對單鏈核酸無酶活性。T4 DNA連接酶需要輔因子ATP。
來源	含有T4噬菌體克隆基因30的大腸杆菌
內含物	T4DNA連接酶，10X T4 DNA連接酶 Buffer
分子量	55.3 kDa，單體
單位定義	在ATP-PPi交換反應中，37°C、20分鍾內將1 nmol[32PPi]轉化為Norit可吸收形式所需要的酶量定義為1 U。
10X T4 DNA Ligase 緩衝液	400 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP(pH7.8, 25°C)
保存緩衝液	20 mM Tris-HCl(pH7.5), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% (v/v) 甘油
用途	粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA複合體中缺口的修複；連接酶介導的RNA檢測；位點特異性突變；擴增片段長度多態性。
抑製	當反應體係中NaCl或KCl的濃度超過200 mM時，可強烈抑製T4 DNA 連接酶活性。
失活	65°C加熱10分鍾或者70°C加熱5分鍾。